荧光定量PCR仪
规格:LightCycler96
生产厂家:Roche
存放地:药学院一号楼202/204室
仪器功能:具有定性定量(绝对定量、相对定量)、自动报告熔解温度、自动报告基因分型结果、高分辨率熔解曲线、阴阳性判读等功能,实时动态监测运行,扩增和检测同时进行。用于基因表达分析研究,目的基因的定量分析,进行SNP单核苷酸多态性和突变位点的分析检测。
操作流程:
1.打开仪器背面的电源开关,Initialization表示仪器开始初始化(期间不能运行试验,但已可设置程序),直到仪器界面左上角出现Ready即为可用状态。
2.设置实验程序
(1) 在LightCycler96应用软件,或者LightCycler96仪器软件创建实验程序;
(2) 打开Rur Editor设置温度包括升降温和循环数;
(3) 选择detection format采集模式和sample volume样品体积;
(4) 保存实验(仪器自动保存)。
3. 开始运行实验
(1)如果在电脑的 LightCycler96应用软件中设置实验,请将实验文件转移到LightCycler96仪器;
A.如果仪器和电脑连接,可以通过Instrument Manager传输文件到仪器;
B.如果仪器没有和网络连接,使用USB转移,注意需要在U盘中创建一个名为
“Experiments”的文件夹,将需要转移的实验文件放入其中。将此U盘插入仪器右侧面上方的U盘接口,按“synchronization”按钮仪器数据可以和U盘同步;
(2)配置好反应体系后,在离心机中离心,排除气泡及贴壁液滴;
(3)将相应的96孔板/8联管放置到仪器中,点击仪器屏幕右侧的弹出按钮,以释放样本装载模块,并手工将装载模块完整地拉出仪器;
(4)在 Overview界面,选择需要运行的实验;
(5)在global界面右面选择Start开始按钮;
(6)在Raw data界面监控实验进度。
4. 实验结束后,将数据转移到电脑的相应应用软件中进行分析:
A.如果仪器和电脑连接,可以通过 Instrument Manager传输文件到电脑;
B.如果仪器没有和网络连接,使用USB转移,将此U盘插入仪器右侧面上方的U盘接口,按“synchronization”按钮,仪器数据可以和U盘同步。文件被转移到U盘中一个名为“Experiments”的文件夹内;
5.编辑样品信息
(1)打开Sample Editor中的plate view;
(2)使用Clear Wells功能剔除没有样品的孔位;
(3)选择做实验的孔位;
(4)在 Reaction properties界面,编辑样品信息;
(5)保存实验。
6.分析数据
(1)在Analysis界面增加分析类型;
(2)打开<analysis>分析设置对话框,设置分析参数;
(3)如果需要可以排除样品;
(4)选择需要显示的结果;
(5)导出数据。
7.关闭仪器
(1)将做完的反应板/管从仪器中拿出;
(2)点击仪器屏幕右侧的退出按钮,根据指示关闭仪器及仪器背后的电源开关;
(3)关闭电脑及总电源。
